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ERM-BF427d 98140玉米标准品材料特性简介

发布时间: 2025-10-21  点击次数: 32次

98140 玉米是由杜邦先锋公司研发的抗虫耐除草剂转基因品种,通过农杆菌转化法转入cry1F 基因(编码 Cry1F 毒蛋白,抗鳞翅目害虫如欧洲玉米螟)和pat 基因(编码草胺膦乙酰转移酶,耐草胺膦类除草剂),已在全球 20 余个国家 / 地区获批种植或进口,其中美国、加拿大批准用于食品 / 饲料加工,中国批准作为加工原料(农业部 2017 年第 2578 号公告)。

当前转基因玉米检测存在两大核心痛点:一是不同检测平台(如 qPCR、dPCR)的引物探针设计差异,导致同一样品检测结果偏差可达 18%-25%(如欧盟联合实验室比对数据);二是缺乏基质匹配的可溯源标准品,造成跨境贸易中 “阈值判定争议"(如欧盟 0.9% 标签阈值)。为此,欧盟联合研究中心参考物质与测量研究所(JRC-IRMM)研制 ERM-BF427d,作为全球的首l个 98140 玉米有证参考物质(CRM),ERM-BF427d 98140玉米标准品旨在统一检测体系量值溯源链,支撑食品饲料标签合规、跨境贸易互认及转基因监管执法。



物质特性与分子基础

1. 分子靶标特征

ERM-BF427d 98140玉米标准品靶向 98140 玉米的两个核心外源基因片段,均匹配国际标准化组织(ISO)及各国监管机构推荐的检测靶标:

cry1F 基因:源自苏云金杆菌,编码的 Cry1F 毒蛋白可特异性结合害虫中肠受体,基因片段长度 492 bp,与其他抗虫基因(如 cry1Ab、cry2Ab)同源性<10%,避免交叉反应;

pat 基因:源自链霉菌,编码的酶可降解草胺膦,基因片段长度 327 bp,符合欧盟委员会法规(EC)No 641/2004 规定的定性检测靶标序列。

两基因的侧翼序列均为玉米基因组片段(Zm-adh1 启动子、nos 终止子),确保检测特异性。


2. 物质形态与组成

ERM-BF427d 98140玉米标准品采用冻干粉末形态(天然玉米基质载体),溶解后为均一混悬液,标准储存液组成如下:

活性成分:98140 玉米基因组 DNA(纯度≥97%,琼脂糖电泳无降解);

基质载体:非转基因玉米粉(含 1.2% 玉米蛋白、0.3% 膳食纤维,模拟实际检测基质);

缓冲体系:20 mmol/L Tris-HCl(pH 8.5)、2 mmol/L EDTA(螯合金属离子,?;?DNA);

稳定剂:8%(w/v)蔗糖(防止冻干过程中 DNA 变性)。

整套标准品含 4 个浓度梯度(ERM-BF427d1-d4),覆盖转基因检测全量程需求:

编号
转基因成分含量(%)
扩展不确定度(k=2)
ERM-BF427d1
10.0
±0.9
ERM-BF427d2
1.0
±0.13
ERM-BF427d3
0.1
±0.016
ERM-BF427d4
0.01
±0.002













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